Wat is het doel van zuurvaste kleuring?

In de microbiologie, kleuring een bacterie betekent om het te kleuren met een kleurstof om het duidelijker te zien onder een microscoop. Als bacteriën niet gekleurd, verschijnen ze helder en kleurloos, en het is moeilijk om hun shapes. Afgezien van hun vormen, hoe gemakkelijk een bacterie is geverfd door bepaalde vlekken - of helemaal niet - geeft vaak een aanwijzing voor de bacteriën te identificeren. Zuurvaste kleuring is een soort kleuring die effectief op sommige bacteriën die niet kan worden gekleurd door andere werkwijzen. Differentiële kleuring

Om een ​​normale bacteriën, vloeibare vlek vlek wordt toegepast op de glijbaan voor ongeveer een minuut, daarna afgespoeld met water. Differentiële kleuring gebruikt verschillende vlekken voor twee verschillende bacteriën in dezelfde dia. Bijvoorbeeld, in een Gram kleuring, de schuif eerst gekleurd met kristalviolet en jood, vervolgens ontkleurd met alcohol. Cellen die Gram-positieve de donkerpaarse kleur van de eerste vlek zelfs nadat de alcohol wordt behouden, terwijl de Gram-negatieve cellen terug naar kleurloos. Dan is een tweede vlek wordt toegepast, in een contrasterende kleur, zoals roze, en de Gram-negatieve cellen zullen roze worden, terwijl de Gram-positieve cellen zullen hun oorspronkelijke vlek.
Geschiedenis
houden

Sommige bacteriën hebben dikke celwanden bestaande uit lipiden, de bouwstenen van vetten, waardoor ze wasachtig en bijna waterdicht maakt. Dit betekent dat een normale vlek kan de cel niet binnendringen. In de jaren 1880, werden de wetenschappers proberen om Mycobacterium tuberculosis, de bacterie die tuberculose veroorzaakt bestuderen. Het zou echter niet houdt regelmatig Gramkleuring behalve indien ondergedompeld in de vlek tot 24 uur. Paul Ehrlich, die later het eerste medicijn effectief tegen syfilis ontwikkeld, ontwikkelde zuurvaste kleuring te dwingen de vlek in de bacteriën. Methode Ehrlich duurde slechts 45 minuten, terwijl de moderne zuurvaste kleuring techniek duurt slechts 5 minuten.
Method

Om de kleurstof, meestal carbol-fuchsine dwingen , in de bacteriën, moet worden verhit boven een beker kokend water gedurende 5 minuten, terwijl de schuif is voortdurend overspoeld met beits en niet uitdrogen. Een alternatieve methode om warmte te gebruiken gemodificeerde Kinyoun carbolfuchsine vlek, die niet hoeft te worden verwarmd, maar het is noodzakelijk dat de slede niet uitdrogen gedurende 5 minuten onderdompeling in de vlek. Welke primaire kleuring methode wordt toegepast, wordt de dia ontkleurd met zuur alcohol - niet regelmatig alcohol - en gekleurd met een secundaire tegenstreng van een andere kleur dan de andere bacteriën die aanwezig kunnen zijn te tonen. Bacteriën die in de eerste vlekken blijven na het ontkleuren met zure alcohol worden zuurvaste genoemd.
Organisme voorzorg

Mycobacterium tuberculosis is uiterst gevaarlijk, en wordt alleen in ziekenhuizen en klinische onderzoeken faciliteiten die aparte kamers of speciaal ontworpen overdracht kappen om besmetting te voorkomen hebben. Het is illegaal om het te gebruiken in een academisch laboratorium. In plaats daarvan, wordt Mycobacterium smegmatis gebruikt, maar het heeft een veel dunnere celwand dan M. tuberculosis, zodat het makkelijker is om per ongeluk over-ontkleuren de glijbaan en verwijder de primaire vlek.
Procedurele voorzorg

Carbol-fuchsine dampen
zijn giftig, dus als ze te verwarmen, gebruik dan een zuurkast aan de dampen bevatten en ontlucht ze naar buiten. Ook het risico van verwarming slides helemaal te vermijden, Kinyoun carbolfuchsine gebruikt worden in plaats, dat een hogere concentratie van fenol en fuchsine, twee werkzame bestanddelen in de vlek is, en hoeft niet te worden verwarmd om de bacteriën binnendringen.