Wat is een confocale microscoop gebruikt?

Gewone lichtmicroscoop kan niet worden gebruikt om een ​​driedimensionaal weefsel observeren zonder fysiek snijden het monster. Confocale scanning microscopie, echter een alternatieve methode observatie dat een directe manier zien de driedimensionale architectuur van geheel unsectioned monster bepaald. Electronic imaging methoden kan de gebruiker zich te richten op een bepaald vliegtuig in een dikke monster terwijl het verwerpen van het licht dat komt van boven en onder het vlak van focus. Waarom confocale microscopie

confocale scanning microscopie
wordt gebruikt door onderzoekers in biologische wetenschappen en andere industrieën om een ​​afbeelding van de driedimensionale architectuur van een monster, zoals een cel of weefsel te verkrijgen. Ook, wordt de procedure voor de microscopische structuur van een monster dat een of andere reden niet kan worden gesneden in secties vooraf observeren. Ook al deze uitdagingen kan worden voldaan door gebruik te maken van een complexe computer-gebaseerde beeldverwerking programma, deze methode is traag en vergt veel rekenkracht.
Confocale microscopie vs Standard lichtmicroscopie

Als een dikke specimen wordt bekeken met een conventionele lichtmicroscoop, wordt het verkregen door te focussen op een specifiek vlak beeld verergerd door wazig, out-of-focus lezingen die afkomstig zijn van de delen van het monster liggen boven en onder het vlak van focus. Voor gewone lichtmicroscoop goed te werken, moet een monster worden gesneden in dunne secties te analyseren, en de dikte van de sectie is omgekeerd evenredig aan duidelijkheid van de afbeelding. Echter, is misschien waardevolle informatie over de derde dimensie verloren wanneer een monster is gesegmenteerd en, zoals gezegd, sommige monsters kan niet coupes gemakkelijk zijn op alle.
Hoe het werkt

De confocale scanning microscoop richt zich op een specifiek vliegtuig in een dikke monster terwijl het verwerpen van het licht dat afkomstig is van out-of-focus gebieden boven en onder dat vliegtuig. Dit resulteert in een schoon "optisch gedeelte" en een reeks van deze doorsneden op verschillende diepte, kan een computerprogramma een driedimensionaal beeld te reconstrueren. Deze strategie is redelijk vergelijkbaar met wat een CAT-scanner doet voor radiologen onderzoeken van een hele menselijk lichaam, omdat beide methodes presenteren schoon doorsneden van het interieur van een intacte structuur van
Hoe het werkt:. De Details

Het apparaat wordt meestal gebruikt met fluorescentie optiek, en op elk moment optische systeem van de machine richt haar schijnwerpers op een enkel punt op een bepaalde diepte in het monster. Een extreem heldere bron van pinpoint verlichting nodig is, en dit wordt doorgaans verstrekt door een laser waarvan het licht wordt doorgegeven door middel van een pinhole. Een detector voorzien van een pinhole opening verzamelt de fluorescentie geëmitteerd door de verlichte monster. Alleen het licht van de specifieke focuspunt in de detector komt, en het apparaat sluit licht afkomstig van gebieden buiten het vlak van de focus.
Specifieke toepassingen

De confocale scanning microscoop wordt vaak gebruikt om de structuur van diverse complexe driedimensionale objecten, zoals netwerken van cytoskelet vezels in het cytoplasma van cellen, en de regelingen van chromosomen en genen in de kern van een cel bij verschillende punten in de celdelingscyclus lossen. Stuifmeelkorrels, bijvoorbeeld een complex gebeeldhouwde celwand, die alleen duidelijk zichtbaar met confocale microscopie. De elektronica-industrie gebruikt ook deze machine en methodologie om halfgeleiders te inspecteren.