Paraffine Embedding Protocol

Wetenschappers meestal nodig om biologische monsters stollen om deel ze uit. Dit maakt het voor wetenschappers kleurstoffen, antilichamen en probes toe te voegen aan het biologische monster. Het vermindert ook de overlay van verschillende cellagen. Wetenschappers gebruiken paraffine als een harde matrix voor het snijden, omdat de paraffine niet met water mengen. Paraffine is een soort koolwaterstof. De biologische monsters bevatten water, zodat de wetenschappers moet uitdrogen de monsters met behulp van steeds meer geconcentreerd ethanol baden. Xyleen

Wetenschappers
verwijder de ethanol met behulp van xyleen. Dan gebruiken ze gesmolten paraffine aan de xyleen te verwijderen. Voor lichtmicroscopie, de paraffine secties zijn meestal vijf micrometer dik. Paraffine is niet hard genoeg voor dunnere plakjes. Wetenschappers rehydrateren het weefsel met behulp van xyleen eerst, dan ethanol. Spoel daarna ze het biologische monster met gedestilleerd water om contaminatie te voorkomen.
Fixing

paraffine ingebedde weefsels
worden meestal bevestigd met neutraal gebufferde formaline, dat is de commerciële versie van formaldehyde. Dit omvat paraformaldehyde en methanol, waarbij de formaldehyde voorkomt omzetten in mierenzuur. Dun gesneden weefsels moeten 48 uur fixatie bij kamertemperatuur optimale histologie, de studie van microscopische anatomie. Anders, het weefsel zal verharden en worden broos. Vóór de verwerking wordt het weefsel meestal opgeslagen in 70 procent ethanol bij een temperatuur van 4 graden Celsius.
Paraffine Processors

Wetenschappers
maken vaak gebruik van paraffine processors te sturen het weefsel door middel van baden die geleidelijk uitdrogen het materiaal vóór hete paraffine door de weefsels kunnen invoeren. Wetenschappers draaien de processor nachts. De processor verwarmt alleen het weefsel voor een bepaalde tijd afhankelijk van het weefsel om het niet hard en bros. De processor maakt gebruik van een vacuüm dat versnelt de permeatie van paraffine en verwijdert luchtbellen. Na verwerking wordt het weefsel opgeslagen in cassettes bij kamertemperatuur.
Wax Melting

paraffine smelt een uur voorafgaand aan het toevoegen van het weefsel. De gehele cassette wordt geplaatst in een 65 graden Celsius paraffine bad gedurende 15 minuten. Een koude aluminium koelelement koelt de paraffine gedurende 20 minuten. Wanneer de was scheuren of de weefsels zijn niet goed uitgelijnd, de wetenschapper smelt de paraffine en herhaalt het proces.
Snijden

Wanneer snijden van de weefsels, de wetenschapper krijgt het waterbad tot 35 tot 37 graden Celsius. Het water is fris en gedemineraliseerd. De blokken worden neer gelegd op een ijs blok of koellichaam voor 10 minuten. Een mes snijdt het blok in secties. Twee problemen die kunnen optreden zijn arm ribboning en fragmenteren exemplaren. Wanneer de specimens fragment, het water te heet. Of het blok niet lint goed, moet je zet het terug op het ijs blok en stevig omhoog de was voordat hij weer verder.