Hepatitis B wordt doorgaans gediagnosticeerd via bloedtesten die de aanwezigheid van specifieke markers detecteren, zoals hepatitis B-oppervlakteantigeen (HBsAg) en hepatitis B-kernantilichaam (HBcAb).

In bepaalde situaties kan een leverbiopsie worden aanbevolen om de ernst van de leverschade te beoordelen en het stadium van fibrose of cirrose te bepalen bij personen met een chronische hepatitis B-infectie. Een leverbiopsie wordt echter niet routinematig uitgevoerd voor de initiële diagnose van hepatitis B.

Bloedonderzoek levert, samen met andere niet-invasieve beeldvormingstechnieken zoals echografie of elastografie, doorgaans voldoende informatie op voor het beheersen en monitoren van een hepatitis B-infectie.