Edman degradatie - een goed bekende werkwijze voor het identificeren van het N - eindstandige aminozuur van een proteïne - vereist splitsing van het aminozuur , gevolgd door identificatie middels chromatografie of elektroforese . Geautomatiseerde te versnellen N - terminale sequentie . De feiten

Eiwitten geproduceerd in individuele cellen fungeren als hormonen , enzymen en andere belangrijke regulatoren . Genetische mutatie resulteert in een abnormaal eiwit kan ernstige gevolgen voor de gezondheid .
Proces

De N - terminale aminozuur wordt gesplitst door behandeling met een van de verschillende reagentia , daarna gehydrolyseerd een afzonderlijke aminozuren te vormen . Dunne laag chromatografie , HPLC of elektroforese bepaalt de grootte van het aminozuur , en vergelijkt deze met een bekende standaardmaat . De nieuwe N - terminale uiteinde van het resterende eiwit kan eveneens worden gesplitst identificatie .
Automatisering

Applied Biosystems leidde de ontwikkeling van het automatiseren Edman degradatie die bindt een gezuiverd eiwit aan een membraan en behandeld met fenylisothiocyanaat . De vrije aminozuren automatisch geïnjecteerd in een HPLC systeem voor identificatie.
Complicaties

Eiwitten moeten relatief zuiver en vrij van verontreinigingen blijven nauwkeurig bepalen van de N - terminale aminozuur . Edman degradatie grenzen vereisen grote eiwitmoleculen versnipperd in kleine peptide ketens niet langer 50 aminozuren .