ELISA of enzymgekoppelde immunosorbent assay is een biologisch laboratorium techniek om de aanwezigheid van een antigeen of antilichaam te detecteren . Het wordt vaak gebruikt in medische diagnose te bepalen of een patiënt is blootgesteld aan een bepaald soort infectie .
Een ELISA , het monster — die het antigeen van belang — is verankerd aan een uitvoeren vaste drager in een schotel . Een oplossing met de complementaire antilichaam wordt toegevoegd aan de schaal en het antilichaam bindt aan het antigeen . Overmaat antilichaam wordt vervolgens weggewassen , waardoor alleen de antigeen - antilichaam gebonden paren in de schotel . Deze kunnen worden gevisualiseerd door toevoeging van een fluorescerend molecuul dat bindt aan het antilichaam en geeft een optisch signaal , dat vervolgens kan worden gekwantificeerd . Zo kan de aanwezigheid en hoeveelheid van het antigeen van belang indirect bepaald .
Western Blot
Western blot is een ander soort techniek gebruikt voor het detecteren een specifiek eiwit in een monster en bepalen de grootte . Eerst worden monster eiwitten verspreid op grootte op een gel met behulp van gel -elektroforese . Op dit punt , eiwitten niet met het blote oog . Wetenschappers vervolgens de eiwitten dragen aan een membraan en voeg een oplossing die het antilichaam aan het antigeen van belang . Na wassen overtollige oplossing wordt het antilichaam gebonden aan het antigeen op het membraan .
Toevoegen van een secundair antilichaam worden het originele , of primaire antilichaam om licht . Kwantificering van de hoeveelheid licht kunnen onderzoekers de aanwezigheid van het antigeen bepalen de grootte in vergelijking met andere eiwitten en de relatieve concentratie .
Immunohistochemie
Immunohistochemie is een techniek waarmee onderzoekers om de locatie van een eiwit te visualiseren in een weefselmonster . Kleine segmenten van een monster bereid en een primair antilichaam, dat hecht aan het antigeen van belang , wordt toegevoegd . Overtollige oplossing wordt weggespoeld voordat onderzoekers voegen een secundair antilichaam . Dit antilichaam hecht aan het primaire antilichaam - antigeen paar en licht uitzendt , signaleren de plaats van het antigeen van belang .
Wetenschappers gebruiken een microscoop te visualiseren waar het antigeen in de cel . Meerdere verschillende antilichamen , die elk specifiek zijn voor een bepaald eiwit kan worden gebruikt om de relatieve locatie van verschillende moleculen te bepalen in een cel . Als dit het doel is, zijn verschillende gekleurde secundaire antilichamen gebruikt om onderscheid te maken tussen de verschillende moleculen van belang .
Doorstroomcytometrie
Fluorescentie - geactiveerde cel sortering — of FACS — is een soort flowcytometrie gebruikt om verschillende typen cellen in een oplossing te scheiden. Elk ander type cel " tag" met een antilichaam specifiek voor dat celtype . Elk van deze antilichamen zendt een andere kleur van het licht . Een machine ageert de oplossing te breken in afzonderlijke druppels en gebruikt een sensor om de kleur van elke druppel detecteren . De machine sorteert de cellen door geëmitteerde kleur , ze te delen op basis van het type van eiwit . FACS methodologie stelt onderzoekers in staat om te sorteren en te kwantificeren cellen van belang zijn voor hun onderzoeksvragen .
Immuno - Elektronen Microscopie
Normaal elektronenmicroscopie kunnen wetenschappers de structuur van een cel te onderzoeken vergroot tot 1 miljoen keer . Immuno - elektronenmicroscopie gebruikt de eigenschappen van antilichaam - antigeen binding aan specifieke eiwitten te visualiseren in zeer dunne weefselcoupes . Eerst antilichamen met aangehechte gouddeeltjes mogen binden aan het antigeen van belang . Een elektronenmicroscoop visualiseert dan de gouddeeltjes , een beeld waar het eiwit is gelokaliseerd in de cel geven onderzoekers .
Hoewel immuno - elektronenmicroscopie is eenvoudig in theorie , is het technisch moeilijk en duur om dienst , beperken de populariteit van het gebruik in vele biologische onderzoeksprogramma's .
Gezondheid en ziekte © https://www.gezond.win