Hoewel Neosporin-zalf infecties bij kleine snij- en schaafwonden kan helpen voorkomen, is het doorgaans niet effectief bij de behandeling van stafylokokbesmettingen. Stafylokokbesmettingen worden veroorzaakt door de bacterie Staphylococcus aureus en vereisen vaak een antibioticabehandeling om de infectie te genezen. Neosporin zalf bevat de antibiotica polymyxine B en neomycine, maar deze antibiotica zijn niet effectief tegen stafylokokbacteriën.