straling hybride mapping is een genetische manipulatie proces dat oorspronkelijk is ontwikkeld voor het construeren lange afstand kaarten van zoogdier chromosomen en ontdekken van de locatie van genetische merkers ten opzichte van elkaar . Radiation hybrid mapping geworteld in een statistisch model om de afstanden tussen desoxyribonucleïnezuur ( DNA ) -merkers en hun volgorde op de chromosomen te meten . DNA- markers zijn zeer kort . Cyclische DNA- sequenties binnen een genoom . Radiation hybrid mapping bewezen onmisbaar voor het lokaliseren van menselijke ziekte genen in het genoom . De relatieve locatie van deze DNA- merkers kunnen worden samengevoegd tot een fysische kaart bekend als een genetische kaart .
Stappen Radiation Hybrid techniek
De eerste stap van het radiation hybrid techniek omvat amplificatie en zuivering van DNA vergelijkbaar met de eerste stap in een sequencingproject . Straling wordt vervolgens gebruikt om het DNA te splitsen in kleinere segmenten en deze segmenten worden vervolgens in een hybride cel opgenomen. De straling hybride cel wordt vervolgens gekweekt worden gekweekt in grote hoeveelheden . Polymerase kettingreactie ( PCR ) en koppelingsanalyse worden gebruikt om de afstand tussen de DNA-merkers te lossen . U kunt eenvoudig controleren op de aanwezigheid van verschillende genetische merkers . Hoe dichter de twee genetische merkers zijn aan elkaar , des te minder is de kans om te worden gescheiden door het DNA - splitsing straling .
Procedure /
Techniek
de procedure van straling hybride techniek omvat het gebruik van twee verschillende cellijnen die in staat overleven in een giftige media . Echter , ze bevatten genen die de toxische media kan weerstaan wanneer gecombineerd in een enkele cel (door productie van een toxine resistente enzym) . De cellijn bestudeerde bestraald ( gewoonlijk door X - stralen ) , waardoor breuken in het DNA . Hierdoor wordt het chromosoom te breken in meerdere delen, die vervolgens worden gefuseerd of geïntegreerd met andere cellijn , waardoor een hybride . Aangezien de hybride genen heeft opgenomen van beide cellijnen en kan de vereiste enzym produceren , zal het overleven in het giftige media .
Teelt
De hybride cel die kunnen overleven nu gekweekt in grote hoeveelheden . Dit versterkt het DNA geërfd van de bestraalde cellijn . Het verkregen monster wordt vervolgens onderworpen aan PCR twee specifieke genetische merkers amplificeren . Door het uitvoeren van de PCR producten op een gel , kan worden nagegaan of beide merkers zijn opgenomen in de verkregen cellijn . De frequentie waarmee de DNA-merkers blijven in elke kloon ( gekweekt monster ) kan worden berekend met behulp van statistische methodes .
Toepassing
gegenereerde kaarten chromosomen om verscheidene soorten zoals de mens , rat , muis en andere genomen vergemakkelijken de vorming van zeer gedetailleerde en nauwkeurige kaarten die aan de studie multifactoriële ziekten . Andere toepassingen zijn onder meer de bepaling van chromosoom locaties van 26 menselijke nieuwe full - length cDNA ( chromosomaal DNA ) .
Gezondheid en ziekte © https://www.gezond.win