Om een normale bacteriën kleuren , vloeibare vlek wordt toegepast op de glijbaan voor ongeveer een minuut , daarna afgespoeld met water . Differentiële kleuring gebruikt verschillende vlekken voor twee verschillende bacteriën in dezelfde dia . Bijvoorbeeld , in een Gram kleuring , de schuif eerst gekleurd met kristalviolet en jodium , daarna ontkleurd met alcohol . Cellen die grampositieve de donkerpaarse kleur van de eerste vlek zelfs nadat de alcohol wordt behouden , terwijl de Gram - negatieve cellen terug naar kleurloos . Dan is een tweede vlek wordt toegepast , in een contrasterende kleur, zoals roze, en de Gram - negatieve cellen zullen roze worden terwijl de Gram - positieve cellen hun oorspronkelijke vlek zal houden .
Geschiedenis
Sommige bacteriën hebben dikke celwanden bestaande uit lipiden , de bouwstenen van vetten , waardoor ze wasachtig en bijna waterdicht maakt . Dit betekent dat een normale vlek kan de cel niet binnendringen. In de jaren 1880 , werden de wetenschappers proberen om Mycobacterium tuberculosis bestuderen , de bacterie die tuberculose veroorzaakt . Het zou echter niet bezit bijvoorbeeld een Gramkleuring , tenzij het is ondergedompeld in de vlek tot 24 uur . Paul Ehrlich , die zich later ontwikkelde het eerste medicijn effectief tegen syfilis , ontwikkeld zuurvaste kleuring om de vlek te dwingen tot de bacteriën . Methode Ehrlich duurde slechts 45 minuten , terwijl de moderne zuurvaste kleuring techniek duurt slechts 5 minuten .
Methode
Om de kleurstof te forceren , meestal carbol - fuchsine , in de bacteriën , het moet meer dan een beker kokend water gedurende 5 minuten verhit , terwijl de schuif voortdurend wordt overspoeld met vlek en niet uitdrogen . Een alternatieve methode om warmte te gemodificeerde Kinyoun carbolfuchsine vlek , die niet hoeft te worden verwarmd gebruiken , maar het is noodzakelijk dat de slede niet uitdroogt gedurende 5 minuten onderdompeling in de vlek . Welke primaire kleuring methode wordt toegepast , wordt de dia ontkleurd met zuur alcohol - niet regelmatig alcohol - en gekleurd met een secundaire tegenkleuring van een andere kleur aan de andere bacteriën die aanwezig kunnen zijn vertonen . Bacteriën die in de eerste vlekken blijven na het ontkleuren met zuur alcohol worden genoemd zuurvaste .
Organisme voorzorg
Mycobacterium tuberculosis is uiterst gevaarlijk , en wordt alleen in ziekenhuizen onderzocht en de klinische faciliteiten die aparte kamers of speciaal ontworpen overdracht kappen om besmetting te voorkomen hebben . Het is illegaal om het te gebruiken in een academisch laboratorium. In plaats daarvan wordt Mycobacterium smegmatis gebruikt , maar het heeft een veel dunnere celwand dan M. tuberculosis , zodat het makkelijker is om per ongeluk over- ontkleuren de glijbaan en verwijder de primaire vlek .
Procedurele voorzorg
Carbol - fuchsine dampen zijn giftig , dus als ze te verwarmen , gebruik dan een zuurkast aan de dampen bevatten en ontlucht ze naar buiten . Ook de gevaren verwarming dia helemaal te vermijden , Kinyoun carbolfuchsine worden gebruikt in plaats , die een hogere concentratie van fenol en fuchsine , twee actieve ingrediënten in de vlek , en hoeft niet te worden verwarmd om de bacteriën binnendringen . < Br
>
Gezondheid en ziekte © https://www.gezond.win