alkalische lysis protocol bestaat uit een reeks oplossingen toegevoegd aan een bacteriële pellet bevattende plasmide DNA. De toegenomen alkaliniteit van de oplossing veroorzaakt cellen barsten . Deze methode van extractie beschermt het plasmide-DNA terwijl het vernietigen van de genomische DNA en denatureren cellulaire eiwitten aan het verstrekken van wetenschapper met een relatief zuiver monster .
SDS en NaOH
Alkaline beschrijft de twee belangrijke chemicaliën gebruikt om de lyse van individuele cellen. Natrium dodecyl ( lauryl ) sulfaat ( SDS ) is een detergens dat de cel gedestabiliseerd door het creëren van gaten in het celmembraan . Natriumhydroxide ( NaOH ) voegt in het afbreken van de celwand , waardoor de cel te desintegreren en laat het genetische materiaal in de oplossing.
Waarom plasmide-DNA overleeft
een bijkomende eigenschap van NaOH in de alkalische lysis protocol is om de waterstofbruggen tussen DNA basenparen verstoren . Deze denatureert genomisch DNA en plasmide- DNA enkelvoudige strengen . De toevoeging van kaliumacetaat aan de oplossing neutraliseert de alkaliteit en de kleine plasmide-DNA kan opnieuw aard en oplossen in de oplossing . Genomisch DNA te groot opnieuw aard zijn gehele lengte . Het en de gedenatureerde eiwitten neerslaan tijdens het centrifugeren het verlaten van het plasmide-DNA in oplossing .
Gezondheid en ziekte © https://www.gezond.win