Zuurvaste kleuring is een microscopietechniek die wordt gebruikt om de aanwezigheid van zuurvaste bacteriën te detecteren, zoals Mycobacterium tuberculosis, die tuberculose (tbc) veroorzaakt. De aanwezigheid van zuurvaste bacillen (AFB) in een sputummonster is een sterke indicatie voor een mogelijke positieve test op tuberculose. Deze bacteriën hebben namelijk een unieke celwandstructuur die tijdens het kleuren bepaalde kleurstoffen vasthoudt, waardoor deze onder een microscoop zichtbaar worden.

De Ziehl-Neelsen-kleuringsmethode, een veelgebruikte zuurvaste kleuringstechniek, omvat de volgende stappen:

1. Bereiding van het sputummonster:De patiënt hoest diep en produceert een sputummonster. Dit monster wordt vervolgens op een glasplaatje uitgesmeerd, waardoor een gelijkmatige verdeling wordt gegarandeerd.

2. Warmtefixatie:Het objectglaasje met het sputumuitstrijkje wordt door hitte gefixeerd om de hechting van de bacteriën aan het objectglaasje te verbeteren en eventuele resterende levende micro-organismen te doden.

3. Kleuring:Het door hitte gefixeerde objectglaasje wordt overspoeld met een primaire kleurstof, meestal carbolfuchsine of basische fuchsine, die een basische kleurstof bevat die de wasachtige celwanden van zuurvaste bacteriën kan binnendringen. Het objectglaasje wordt zachtjes verwarmd om de penetratie van de kleurstof te vergemakkelijken.

4. Wassen met zuuralcohol:het objectglaasje wordt vervolgens gespoeld met een zuuralcoholoplossing, die de meeste bacteriën ontkleurt, behalve de zuurvaste bacillen, die de primaire vlek vasthouden.

5. Tegenkleuring:Om contrast te geven en om de niet-zuurvaste bacteriën zichtbaar te maken, wordt een tegenkleuring, zoals methyleenblauw, aangebracht.

Na voltooiing van deze stappen wordt het objectglaasje onder een microscoop onderzocht met behulp van olie-immersie om de aanwezigheid van zuurvaste bacillen te detecteren. Als AFB wordt waargenomen, duidt dit op een mogelijke tuberculose-infectie en worden verdere diagnostische tests, zoals kweek- en moleculaire testen, uitgevoerd om de diagnose te bevestigen en het juiste behandelingsregime te bepalen.

Het is echter belangrijk op te merken dat de aanwezigheid van AFB in een sputummonster alleen de tuberculose niet definitief bevestigt, en dat een combinatie van klinische bevindingen, laboratoriumtests en medische expertise vereist is voor een nauwkeurige diagnose en behandeling van tuberculose.