Jamestown Canyon is een vallei in Tuolumne County, Californië, Verenigde Staten, in het Yosemite National Park. De kloof ligt op de zuidwestelijke flank van de bergen van de Sierra Nevada en wordt in het noorden en oosten begrensd door de rivier de Tuolumne, en in het zuiden en westen door de rivier de Merced. De kloof is ongeveer 16 km lang en 1,6 km breed en heeft een maximale diepte van ongeveer 760 meter.

Jamestown Canyon werd gevormd door gletsjers tijdens de laatste ijstijd, die de vallei uitsneden en het karakteristieke U-vormige profiel van gletsjervalleien achterlieten. De kloof herbergt ook een aantal watervallen, waaronder de 30 meter hoge Cascade Falls, de 22 meter hoge Fissure Falls en de 15 meter hoge Ribbon Falls.

De kloof is een populaire bestemming om te wandelen, kamperen en vissen. Het belangrijkste wandelpad door de kloof is de Tuolumne River Trail, die de Tuolumne-rivier gedurende 16 km volgt van Tuolumne Meadows naar Pate Valley. Het pad biedt een prachtig uitzicht op de kloof en de omliggende bergen, en is ook de thuisbasis van een aantal wilde dieren, waaronder herten, beren en bergleeuwen.

Jamestown Canyon herbergt ook een aantal historische bezienswaardigheden, waaronder de Jamestown Cabin, die in 1851 werd gebouwd door goudzoekers. De hut is nu een museum en is tijdens de zomermaanden open voor het publiek.

Jamestown Canyon is een prachtige en schilderachtige vallei en een geweldige plek om de natuurlijke schoonheid van Yosemite National Park te ervaren.